无菌室洁净度的检测方法与步骤

无菌室洁净度的检测方法与步骤

无菌室在消毒处理后、无菌试验前及操作过程中需要检测空气中的菌落数，以此来判断无菌室是否达到规定的洁净度。

一、无菌室洁净度的检测方法主要有沉降菌和浮游菌测定方法两种：

（1）沉降菌检测方法与标准：

以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室，在操作区台面左、中、右各放1个；打开平板盖，在空气中暴露30min后将平板盖好，置36℃±1℃培养48h，取出检测，3个平板上生长的菌落数平均小于1个。

（2）浮游菌检测方法及标准：

用专门的采样器，宜采用撞击法机制的采样器（宏瑞科技FSC-A6），一般采用狭缝式或离心式采样器，并配有流量计和定时器，严格按仪器说明书的要求操作并定时校验，采样器和培养皿进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，使用的培养基为营养琼脂或药典认可的其他培养基。使用时，先开动真空泵抽气，时间不少于5min，调节流量、转盘、转速。关闭真空泵，放入培养皿，盖上采样器盖子后调节缝隙高度。置采样品采样点后，依次开启采样器、真空泵，转动定时器，根据采样量设定采样时间。

全部采样结束后，将培养皿置36℃±1℃培养48h，取出检测，浮游菌落数不得超过5个/m3。每批培养基应选定3只培养皿做对照培养。

无菌操作台面或超净工作台还应定期检测其悬浮粒子，应达到100级（可用宏瑞科技尘埃粒子计数器）检测，并根据无菌状况必要时置换过滤器。

• 定期进行洁净度再验证：

定期或者当无菌室设施发生重大改变时，要换国家标准GB/T16292-16294-1996《医药工业无菌室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》进行洁净度再验证，以确保洁净度符合规定，保存验证原始记录，定期归档保存，并将验证结果记录在无菌室使用登记册上，作为实验环境原始依据及趋势分析资料。并定期对无菌室的环境检测数据进行趋势分析和评估，根据评估结果，了解无菌室设施环境质量的稳定状况及变化趋势，决定是否有必要修订相应的警戒和纠偏限度。

• 定期更换新的紫外灯管、更换净化系统的初效、中效、头：

定期（至少每年1次）更换新的紫外灯管，以确保紫外灯管灭菌持续有效。并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。至少2年1次，或按无菌室验证实际情况，定期更换初效、中效、头以确保净化系统的功能持续有效，并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。